Затухание флуоресценции

Время жизни возбужденного состояния и законы затухания флуоресценции [c.259]

Когда луч аргонового лазера высокой мощности проходит через акриловые смолы оптического качества или через некоторые чистые стекла, он вызывает флуоресценцию в оранжевой части спектра. Поскольку время затухания флуоресценции велико, порядка 1 сек, при таком методе мы получаем превосходный источник ослабленного излучения, которое пропорционально средней выходной мощности лазера. Рассеянный сине-зеленый свет аргонового лазера легко отличить от излучения флуоресценции по цвету. [c.29]

В течение последних десятилетий в оптике и спектроскопии существовали отчетливые возможности создания новых методов термометрии, основанных на активном зондировании твердых тел световым пучком для измерения температурно-зависимых параметров, например, ширины запрещенной зоны кристалла, действительной и мнимой частей комплексного показателя преломления, времени затухания флуоресценции, отношения интенсивностей стоксовой и антистоксовой компонент рассеянного излучения. [c.195]

Изменение спектра люминесценции или затухания флуоресценции во времени как функции состава [c.40]

За поглощением света обычно следует несколько других процессов. Возбуждение флуорофора, как правило, происходит до некоторого высшего колебательного уровня состояний (51 либо 8 ).3в некоторыми редкими исключениями, для молекул в конденсированной фазе характерна быстрая релаксация на самый нижний колебательный уровень состояния 5 . Этот процесс называется внутренней конверсией и происходит большей частью за 10 с. Поскольку типичные времена затухания флуоресценции близки к 10 с, внутренняя конверсия обычно полностью заканчивается до процесса испускания. Следовательно, испускание флуоресценции чаще всего осуществляется из термически равновесного возбужденного состояния. Аналогично поглощению обратный переход электронов на самый нижний электронный уровень также приводит к колебательно возбужденному состоянию (рис. 1.3). Термическое равновесие достигается за время порядка [c.14]

Время ЖИЗНИ возбужденного состояния определяется как среднее время, в течение которого молекула находилась в возбужденном состоянии до того, как вернуться в основное состояние. Обычно время затухания флуоресценции 10 ПС. Для флуорофора, описываемого диаграммой Яблонского (рис. 1.8), время затухания равно [c.20]

Измерение времен затухания флуоресценции [c.61]

Фазовые и модуляционные измерения времен затухания флуоресценции [c.63]

Принципы фазово-модуляционных измерений иллюстрируются графиками бив на рис. 3.2. Здесь представлена зависимость m и ф от времени затухания флуоресценции п Н частотах модуляции 10 и 30 МГц Ясно видно, что [c.63]

И определим связь между временем затухания флуоресценции и величинами фазового сдвига (ф) и степени демодуляции [c.66]

При измерении времен затухания флуоресценции импульсным методом необходимо количественно измерять затухания интенсивности флуоресценции с временным разрешением. Такие измерения трудны по нескольким причинам. Во-первых, доступные источники света дают импульсы длительностью в несколько наносекунд, поэтому простую теорию, описываемую [c.66]

В стробоскопическом методе фотоумножитель периодически включается на короткое время в течение затухания флуоресценции (разд. 3.3.2). Использование пульсирующего напряжения увеличивает коэффициент усиления ФЭУ на короткий период времени, когда происходит затухание флуоресценции (обычно 0,2 - 1 нс). Время подачи этого анализирующего импульса постепенно смещается таким образом, что после каждого последовательного импульса регистрируются различные участки кривой затухания. Если интенсивность и форма возбуждающего импульса постоянны, при большом числе стробирующих импульсов, каждый из которых регистрируют через разные промежутки времени после возбуждения, можно получить полную кривую затухания флуоресценции во времени. [c.67]

ФЛУОРОМЕТР—прибор для измерения времени т затухания флуоресценции —10 с). Действие Ф. основано на том, что при модулированном с частотой ш фо- [c.329]

Совр. приборы для измерения t основаны на возбуждении флуоресценции импульсами пико- и фемтосекундной длительности и измерении хода затухания флуоресценции при помощи осциллографа или счётчика фотонов (см. Фемтосекундная спектроскопия). М. Д. Шанин. [c.329]

Люминесценция - испускание фотонов из электронно-возбужденных состояний - делится на два типа в зависимости от природы основного и возбужденного состояний. В синглетном возбужденном состоянии электрон на энергетически более высокой орбитали и второй электрон на орбитали с более низкой энергией имеют противоположную ориентацию спинов. Говорят, что эти электроны спарены. В триплетном состоянии эти электроны не спарены, т.е. их спины имеют одинаковую ориентацию. При возвращении электрона из возбужденного синглетного состояния в основное ориентация его спина не должна меняться. Изменение ориентации спина необходимо при переходе из триплетного состояния в сииглетное основное состояние. Флуоресценция - это испускание, происходящее при возвращении спаренного электрона на более низкую орбиталь. Такие переходы квантовомеханически разрешены", а типичные величины скоростей испускания для них 10 с Ч Высокие значения скоростей испускания приводят к временам затухания флуоресценции 10-в с (10 нс). Время жизни -г это средний период времени, в течение которого флуорофор находится в возбужденном состоя-нии.Фосфоресценция- это испускание, происходящее при переходе между состояниями различной мультиплетности , как правило из возбужденного триплетного состояния в синглетное основное. Такие переходы не разрешены, и константы скорости испускания малы. Типичный диапазон времени затухания фосфоресценции - )т миллисекунд до секунд, что главным образом зависит от вклада других процессов дезактивации. В данной книге повсюду мы в первую очередь будем рассматривать более быстрый процесс флуоресценции. [c.10]

Тушение флуоресценции молекулярным кислородом по механизму столкновений является показательным примером размеров пространственного и временного диапазонов, представляемых временем затухания флуоресценции. Если флуорофор, находящийся в возбужденном состоянии, сталкивается с молекулой кислорода, он возвращается в основное состояние без испускания фотона. Коэффициент диффузии кислорода в воде при 25°С равен 2,5 10 см /с. Среднее расстояние [ (Ах ) З, на которое может диффун-дир()1 ать молекула кислорода за 10- с, определяется уравнением Эйнштейна [c.23]

БЕЛКИ. Триптофан - наиболее интенсивно флуоресцирующая аминокислота в белках. Около 90% всей флуоресценции белков обы шо обусловлено триптофаповыми остатками. Этот природный флуорофор крайне чувствителен к полярности окружающей среды. Спектральные сдвиги часто являются следствием нескольких явлений, среди которых можно выделить связывание лигандов, ассоциацию белок - белок и денатурацию. Кроме того, максимумы испускания белков отражают среднюю доступность их триптофановых остатков в водной фазе. Белки поглощают све-г вблизи 280 нм, а максимумы спектров флуоресценции лежат в области 320 -350 нм. Времена затухания флуоресценции триптофановых остатков лежат в диапазоне 1-6 нс. [c.24]

Существуют два широко используемых метода измерений времен затухания флуоресценции импульсный и фазово-модуляциониый (или гармонический). В импульсном методе образец освещают короткими импульсами света и измеряют зависимость интенсивности флуоресценции от времени. [c.61]

Вторая трудаость при измерении времен затухания импульсным методом вызвана сложностью измерения полной кинетики затухания при использовании только одного возбуждающего импульса. Такие измерения потребовали бы системы регистрации с большим коэффициентом усиления и с субнаносекупде 1ым временным разрешением,, Чтобы обойти эту трудность, образец обычно возбуждают повторяющимися импульсами. Естественно, что при этом время между импульсами должно быть примерно в пять раз больше времени затухания для того, чтобы сигналы флуоресценции от двух последовательных импульсов пе накладывались. При периодически повторяющихся импульсах затухание флуоресценции регистрируют либо стробоскопическим методом, либо методом счета фотонов. Эти методы, которые мы обсудим ниже, ранее были детально описаны в литёратуре [ 1, 2]. Применение таких методов позволяет обойтись без системы, необходимой для измерения полной кривой затухания при возбуждении единственным импульсом. [c.67]

ЛАЗЕРЫ И СИНХРОТРОНЫ. Возможно, что в будущем импульсные лампы заменят другие источники света. Один из таких источников - импульсные лазеры. Например, лазер на ионах аргона может иметь селекцию мод в ультрафиолете и давать импульсы с длиной волны 351 нм и длительностью 100 нс при частоте повторения 76 МГц [28J. С помощью такого источника возбуждения можно разрешить две экспоненты в кривой затухания флуоресценции NADH с временами затухания 0,2 и 0,7 пь [ 28]. Среднее время затухания NADH составляет 0,4 пс. Можно также по- [c.71]

Зависимость интенсивности вспышки от времени [L t)] обычно определяют в отдельном эксперименте. Поскольку форма вспышки меняется со временем, измерения необходимо проводить непосредственно до или после измерения затухания флуоресценции. Обычно L t) измеряют, H nojuyjyH [c.76]

РИС. 3.7. Графическое выражение закона затухания флуоресценции фосфолипидных везикул с метками TNS (по данным [б1). [c.77]

Вывод этого выражения хорошо описан несколькими авторами [2, i81 Импульс лампы можно рассматривать как болыпое число коротких импульсов, приходящих D0 Bpe.Mii и имеющих равную длительность Ai (причем at гораздо меныпе премепи затухания флуоресценции образца). Каждый такой импульс вызывает импульсный отклик u6 )u3Ua [c.77]

Энциклопедия по машиностроению XXL

Оборудование, материаловедение, механика и ...