Затухание флуоресценции кинетика

РИС, 10.14. Рассчитанная кинетика затухания флуоресценции донора [ ]. [c.328]

РИС. 10.19. Распределение вероятности, полученное для маркированных олигомеров из кинетики затухания флуоресценции донора. [c.334]

Ответьте на следующие вопросы, касающиеся кинетики затухания флуоресценции акридина [c.435]

Рис. 6. Кинетика затухания индуцированной флуоресценции при непрерывном освещении (546 ммк).

Кинетика затухания анизотропии флуоресценции [c.163]

Вторая трудаость при измерении времен затухания импульсным методом вызвана сложностью измерения полной кинетики затухания при использовании только одного возбуждающего импульса. Такие измерения потребовали бы системы регистрации с большим коэффициентом усиления и с субнаносекупде 1ым временным разрешением,, Чтобы обойти эту трудность, образец обычно возбуждают повторяющимися импульсами. Естественно, что при этом время между импульсами должно быть примерно в пять раз больше времени затухания для того, чтобы сигналы флуоресценции от двух последовательных импульсов пе накладывались. При периодически повторяющихся импульсах затухание флуоресценции регистрируют либо стробоскопическим методом, либо методом счета фотонов. Эти методы, которые мы обсудим ниже, ранее были детально описаны в литёратуре [ 1, 2]. Применение таких методов позволяет обойтись без системы, необходимой для измерения полной кривой затухания при возбуждении единственным импульсом. [c.67]

В противоположность анализу импульсной кинетики затухания флуоресценции в литературе не появилось пока детального описания фазово-модуляционных методов анализа простых смесей флуорофоров. Далее, очевидно, что весовые факторы, используемые в уравнении (3.43), но подходят. Возможно, этот метод необходимо модифицировать, чтобы использовать ошибки в измерении величии < ф > и < т>. Как было показано ранее в этой главе, погрешности в<ф>и<т>не переносятся линейно на ошибки в [c.92]

Разностная поляризационно-фазовая флуорометрия (РПФ) представляет собой один из методов изучения кинетик затухания анизотропии. В этом методе образцы возбуждают поляризованным синусоидально-модулированным светом и измеряют разность фаз (Л = — фц ) между перпендикулярной и параллельной компонентами испускания. Эта разность фаз зависит от г , частоты модуляции, скорости вращения флуорофора, свободы и изотропности вращений. Следовательно, можно получить информацию о виде r t). Как и в случае измерения времен затухания флуоресценции фазовым методом (гл.З), получают косвенную информацию, особенно когда измерения проводят с использованием одной частоты модуляции. И тем не менее, в этих измерениях содержится ценная информация об анизотропии [ 22, 23] и затрудненности вращений [24] и могут быть измерены скорости быстрых вращений [ 25].. [c.180]

В предыдущих разделах были описаны инструментальные средства для получения информации о кинетике затухания анизотропии. Такую информацию можно получить, не проводя временных измерений, если существует метод, в котором время затухания флуоресценции можно варьировать [35, 36].. Тушение флуоресценции при столкновениях дает именно такую возможность (гл. 9). Пелый ряд молекул действуют как тушители при столкновении, например молекулярный кислород. В присутствии кислорода время затухания флуоресценции т равно [c.188]

Следовательно, можно ожидать, что отсекаемый отрезок на оси у будет равен нулю это и является наблюдаемым результатом. Кроме того, график зависимости г от г - г)/т линеен [ 36]. Такая линейность в области времен затухания эквшалентна экспоненциальному затуханию анизотропии во временной области. Следовательно, в минеральном масле DPH вращается незатрудненно и изотропно. Совершенно иные результаты наблюдаются для DPH, связанного с.везикулами DMP . В этом случае наблюдаются значительные ненулевые значения, что очевидно из ненулевого отрезка, отсекаемого на оси у. Значения находятся в точном соответствии с результатами, полученными кинетическими и дифференциально-фазовым методами. Ценность этих результатов состоит в том, что даже стационарные методы могут давать надежную информацию о кинетике затухания, если имеется подходящий способ изменять времена затухания флуоресценции. [c.190]

Методы измерения фазовых сдвигов и степени демодуляции флуоресценции также были использованы для регистрации зависящих от времени спектральных сдвигов в меченых мембранах [33]. Таких данных значительно меньше, чем результатов, полученных импульсным измерением кинетики затухания, по в основном оба метода согласуются между собой. На рис. 8.21 изображены графические зависимости кажущихся фазовых т и модуляционных т" времен затухания флуоресценции для TNS, растворенного в глицерине и связанного с везикулами диолеил-1.-а-фосфатидилхолина. Было найдено, что на длинноволновом краю спектра испускания тР > т ". Это соответствует появлению члена с отрицательным предэкспоненЦиальным множителем в законе затухания (см. рис. 8.17) и свидетельствует о том, что про- [c.256]

Новое и в равной степени интересное приложение метода переноса энергии определение статических и динамических конформационных свойств макромолекул в растворе [ 4]. При детальном анализе кинетики затухания флуоресценции донора можио в принципе определить распределение расстояний между парами й - о и скорость, с которой донор и акцептор диффундируют относительно друг друга. С помощью таких измерений можно было бы выявлять детали структурной гетерогенности макромолекул и струк1 р1-1ые флуктуации этих молекул на сравнительно больших расстояниях ( 40 А). В настоящее время подобный детальный анализ требует тщательной оценки как при получении, так и при интерпретации спектральных данных, Тем не менее выявленные возможности метода переноса энергии скорее всего приведут к непрерывному развитию необходимых методов. [c.307]

Кинетика затухания флуоресценции донора довольно чувогвителгэиа к усредненному расстоянию d - а ПК ширине распределения вероятности. Предполагав- [c.330]

В предыдущем разделе говорилось о том, что диффузия доноров и акцепторов может усиливать эфф( ктипность переноса энергии она приводит к сложной кинетике затухания флуоресценции донора и усложняет интерпретацию данных. Одиако ситуация упрощается в приближении быстрой диффузии. При выводе уравнения Фсфсггсра П[)е/тола[ а( тся, что за время затухания флуоресцен- [c.336]

Гснерь рассмотрим раствор, содержащий и допор,и акцептор, равномерно распределенные в растворе. Важно отметить, что и кинетика затухания, и о г-иосител1)НЫе квантовые выходы флуоресценции донора представляют собой сложные функции концентрации акцептора. При возбуждении 5-импульсом кинетика затухания флуоресценции донора определяется выражением [24 - 26] [c.339]

Протонироваиие акридина в возбуждвнном состоянии изучали, измеряя кинетику затухания флуоресценции. Как было описано более детально в разд. 12.5, нейтральный акридин лротонируется в возбужденном состоянии ионами аммония. В табл. 12.3 приведены полученные импульсные функции отклика дпя акридина в 0,2 М при рИ 8.3. [c.435]

Табпица 12.3. Параметры кинетики затухания флуоресценции акридина в [c.436]

Пусть / (i) отображает кинетику затухания 0бн10Й интенсивности флуоресценции [/ (г) +2 (i)]. Стационарное измерение анизотропии является в действительности усреднением r t) с весом l t). Таким образом, [c.145]

Кинетика затухания анизотропии флуоресценции измеряется при импуль сном возбуждении, как это описано при обсуждении измерений времон затухания (гл. 3). Для отбора необходимой поляризоваппой составляющей возбуж- [c.163]

В заключение рассмотрим кинетики затухания интенсивности флуоресценции, ожидаемые для смеси флуорофоров. Предположим, что имеются два флуорофора или один флуорофор, но в двух разных окружениях. Кинетика [c.170]

Как правило, нуклеиновые кислоты не проявляют заметной флуоресценции. Однако tRNAP из дрожжей имеет необычное сильно флуоресцирующее основание, названное Y-основанием. По кинетикам затухания анизотропии флуоресценции было изучено влияние на вращательную диффузию tRNA. Результаты показывают, что У-оонование подвижнее, чем предполагалось для сферы равного объема. Следовательно, можно считать, что У-основание вращается независимо от молекулы tRNA в целом [21]. [c.179]

Смотреть страницы где упоминается термин Затухание флуоресценции кинетика : [c.80] [c.163] [c.176] [c.190] [c.248] [c.250] [c.316] [c.328] [c.329] [c.334] [c.335] [c.346] [c.369] [c.376] [c.386] [c.68] [c.69] [c.145] [c.159] [c.162] [c.165]

Энциклопедия по машиностроению XXL

Оборудование, материаловедение, механика и ...