Время затухания флуоресценции

Когда луч аргонового лазера высокой мощности проходит через акриловые смолы оптического качества или через некоторые чистые стекла, он вызывает флуоресценцию в оранжевой части спектра. Поскольку время затухания флуоресценции велико, порядка 1 сек, при таком методе мы получаем превосходный источник ослабленного излучения, которое пропорционально средней выходной мощности лазера. Рассеянный сине-зеленый свет аргонового лазера легко отличить от излучения флуоресценции по цвету. [c.29]

За поглощением света обычно следует несколько других процессов. Возбуждение флуорофора, как правило, происходит до некоторого высшего колебательного уровня состояний (51 либо 8 ).3в некоторыми редкими исключениями, для молекул в конденсированной фазе характерна быстрая релаксация на самый нижний колебательный уровень состояния 5 . Этот процесс называется внутренней конверсией и происходит большей частью за 10 с. Поскольку типичные времена затухания флуоресценции близки к 10 с, внутренняя конверсия обычно полностью заканчивается до процесса испускания. Следовательно, испускание флуоресценции чаще всего осуществляется из термически равновесного возбужденного состояния. Аналогично поглощению обратный переход электронов на самый нижний электронный уровень также приводит к колебательно возбужденному состоянию (рис. 1.3). Термическое равновесие достигается за время порядка [c.14]

Время ЖИЗНИ возбужденного состояния определяется как среднее время, в течение которого молекула находилась в возбужденном состоянии до того, как вернуться в основное состояние. Обычно время затухания флуоресценции 10 ПС. Для флуорофора, описываемого диаграммой Яблонского (рис. 1.8), время затухания равно [c.20]

Значительно легче вводить поправки на указанные эффекты при измерениях фазово-модуляционными методами. /1,лину полны наблюдения подбирают, используя эталонные соединения. Зная времена затухания флуоресценции этих соединений, рассчитывают фазу и степень модуляции па/],ающе-го света, теперь ужо не зависящие от описанных выше артефактов. Подобные "обратные" расчеты пе были описаны для преобразования профиля вспышки лампы, полученного в виде сигнала от эталонного соединения. [c.99]

Влияние рассеянного света на измерения времен затухания. Предположим, что измеряют время затухания флуоресценции связанного с мембраной белка, действительное время затухания которого предполагается равным 4,0 нс. Образец мутный и рассеивает 10% падающего на него возбуждающего света. Предположим, что о присутствии этого рассеянного света не подозревают и регистрируют его как испускание. [c.104]

Время затухания флуоресценции при каждом давлении может быть вычислено ло уравнению [c.447]

Время жизни возбужденного состояния и законы затухания флуоресценции [c.259]

Времена затухания и квантовые выходы флуоресценции [c.19]

БЕЛКИ. Триптофан - наиболее интенсивно флуоресцирующая аминокислота в белках. Около 90% всей флуоресценции белков обы шо обусловлено триптофаповыми остатками. Этот природный флуорофор крайне чувствителен к полярности окружающей среды. Спектральные сдвиги часто являются следствием нескольких явлений, среди которых можно выделить связывание лигандов, ассоциацию белок - белок и денатурацию. Кроме того, максимумы испускания белков отражают среднюю доступность их триптофановых остатков в водной фазе. Белки поглощают све-г вблизи 280 нм, а максимумы спектров флуоресценции лежат в области 320 -350 нм. Времена затухания флуоресценции триптофановых остатков лежат в диапазоне 1-6 нс. [c.24]

Предположим теперь, что образец представляет собой смесь двух флуорофоров (Л и 5), времена затухания флуоресценции которых тд и тв не заь висят от длины волны испускания (рис. 4Л). Для того чтобы при измерениях методом ФЧРФ спектры А и Рне налагались, фазовые углы (ф и ф ) или времена затухания должны быть различными. Предположим, что а " д. Зависимость флуоресценции от времепи определяется выражением [c.108]

I,2 г/см . Времена затухания флуоресценции белков, меченных флуоресцеин ом, дансилом и пиренбутиратом равны 4, 10 и 100 нс соответственно. Примите для этих же зондов, что гд равно 0,38, 0,30 и 0,15 соответственно. [c.161]

Было найдено, что анизотропия не затухает до пуля, когда вращательные движения флуорофора затруднены. Под затруднением мы подразумеваем, что угловой диапазон вращательных движений ограничен. В таких случаях предельная анизотропия наблюдается при больших временах, чем времена затухания флуоресценции. Сравнение кинетйк затухания анизотропии для свободного и затрудненного флуорофора приведено на рис. 6.3. Как обычно, r(t) для свободной молекулы затухает экспоненциально до нуля. В противоположность этому г(е) для затрудненного вращения может описываться выражением [c.169]

B приведенных формулах нет зависимостей от частоты модуляции. Это корректные выражения для средней продолжительности нахождения в возбужденном состоянии, но нужно помнить, что средняя продолжительность ие измеряется фазовым флуорометром. Наши комментарии не означают критики ранних пионерских работ по изучению вращательной диффузии методом фазовой флуоресценции. Скорее мы хотим подчеркнуть необходимость правильной интерпретации данных, полученных методом фазовой флуорометрии, при котором исследователям необходимо помнить, что измеряемыми величинами являются фазовые углы, но не времена затухания флуоресценции. [c.184]

В предыдущих разделах были описаны инструментальные средства для получения информации о кинетике затухания анизотропии. Такую информацию можно получить, не проводя временных измерений, если существует метод, в котором время затухания флуоресценции можно варьировать [35, 36].. Тушение флуоресценции при столкновениях дает именно такую возможность (гл. 9). Пелый ряд молекул действуют как тушители при столкновении, например молекулярный кислород. В присутствии кислорода время затухания флуоресценции т равно [c.188]

Следовательно, можно ожидать, что отсекаемый отрезок на оси у будет равен нулю это и является наблюдаемым результатом. Кроме того, график зависимости г от г - г)/т линеен [ 36]. Такая линейность в области времен затухания эквшалентна экспоненциальному затуханию анизотропии во временной области. Следовательно, в минеральном масле DPH вращается незатрудненно и изотропно. Совершенно иные результаты наблюдаются для DPH, связанного с.везикулами DMP . В этом случае наблюдаются значительные ненулевые значения, что очевидно из ненулевого отрезка, отсекаемого на оси у. Значения находятся в точном соответствии с результатами, полученными кинетическими и дифференциально-фазовым методами. Ценность этих результатов состоит в том, что даже стационарные методы могут давать надежную информацию о кинетике затухания, если имеется подходящий способ изменять времена затухания флуоресценции. [c.190]

Как известно, кислород растворяется в водных и огранических растворах и является динамическим тушитепем флуоресценции, влияя на интенсивности и времена затухания флуоресценции. Определите, чему равны времена затухания, выше которых растворенный кислород из атмосферы будет вызывать изменения в интенсивности и временах затухания флуоресценции, превышающие предел точности 3% Укажите времена затухания для водных и этанольных растворов. Для ответа на этот вопрос исполь зуйте следующую информацию (й езодз) = 1 с (в этаноле) [c.302]

Табпица 11.1. Максимумы испускания и времена затухания флуоресценции белков, содержащих единственный остаток триптофана [22] [c.359]

На оси справа — фазовые углы по отношению к возбуждающему свету. Разность фазовых углов между длинноволновой (ф . ) и коротковолновой (фу .) частями спектра дает время затухания флуоресценции катиона акридиния. По фазовым углам, измеренным относительно возбуждающего света, нельзя получить истинные значения времен затухания для катиона акриДиния. [c.425]

В) Предскажите влияние уменьшения частоты модуляции со на вепичины т и ш/со8<р для больших длин волн. В частности, рассмотрите данные, полученные при pH 6,6 для частоты модуляции ш = 2тт 6 МГц и длины волны 420 нм, Предполо -жим что время затухания флуоресценции нафтолята равно 8,9 нс. Каковы экспериментальные следствия использования более низкой частоты модуляции [c.436]

Предположим, что затухание подчиняется одноэкслоненциальному закону. Тогда время затухания флуоресценции — это время, за которое интенсивность уменьшится до 37% первоначальной величины = 1 нс при 390 нм и т = 5 нс при 435 нм. Время жизни состояния F можно определить из соотношения 1/т = 1/т + 1/т,. Следовательно, т = 1,25 НС. [c.449]

Люминесцентная (флуоресцентная) М. использует явление фотолюминесценции (см. Люминесценция), свойственное либо природе самого микрообъекта (в большинстве случаен биологического), либо полученное им после окраски спец, красителями — флуорохро-иами (вторичная люминесценция). При этом наблюдается цветная контрастная картина свечения, позволяющая выявить морфологич. и хпм. особенности объектов (рис. 1, д). В люминесцентной М. обычно используется флуоресценция, имеющая короткое время затухания. Схема люминесцентного микроскопа отличается от схемы обычного микроскопа наличием двух светофильтров в осветит, системе и после объектива. Первый выделяет возбуждающее излучение, а второй пропускает только свет флуоресценции. [c.147]

Люминесценция - испускание фотонов из электронно-возбужденных состояний - делится на два типа в зависимости от природы основного и возбужденного состояний. В синглетном возбужденном состоянии электрон на энергетически более высокой орбитали и второй электрон на орбитали с более низкой энергией имеют противоположную ориентацию спинов. Говорят, что эти электроны спарены. В триплетном состоянии эти электроны не спарены, т.е. их спины имеют одинаковую ориентацию. При возвращении электрона из возбужденного синглетного состояния в основное ориентация его спина не должна меняться. Изменение ориентации спина необходимо при переходе из триплетного состояния в сииглетное основное состояние. Флуоресценция - это испускание, происходящее при возвращении спаренного электрона на более низкую орбиталь. Такие переходы квантовомеханически разрешены", а типичные величины скоростей испускания для них 10 с Ч Высокие значения скоростей испускания приводят к временам затухания флуоресценции 10-в с (10 нс). Время жизни -г это средний период времени, в течение которого флуорофор находится в возбужденном состоя-нии.Фосфоресценция- это испускание, происходящее при переходе между состояниями различной мультиплетности , как правило из возбужденного триплетного состояния в синглетное основное. Такие переходы не разрешены, и константы скорости испускания малы. Типичный диапазон времени затухания фосфоресценции - )т миллисекунд до секунд, что главным образом зависит от вклада других процессов дезактивации. В данной книге повсюду мы в первую очередь будем рассматривать более быстрый процесс флуоресценции. [c.10]

Смотреть страницы где упоминается термин Время затухания флуоресценции : [c.189] [c.24] [c.61] [c.62] [c.103] [c.109] [c.112] [c.115] [c.119] [c.119] [c.120] [c.143] [c.146] [c.153] [c.171] [c.216] [c.222] [c.237] [c.248] [c.249] [c.275] [c.376] [c.384] [c.389] [c.425] [c.359] [c.324] [c.48]

Основы флуоресцентной спектроскопии (1986) -- [ c.10 , c.19 , c.20 , c.61 , c.62 , c.63 , c.64 , c.65 , c.66 , c.67 , c.68 , c.69 , c.70 , c.71 , c.72 , c.73 , c.74 , c.75 , c.76 , c.77 , c.78 , c.79 , c.80 , c.81 , c.82 , c.83 , c.84 , c.85 , c.86 , c.87 , c.88 , c.89 , c.90 , c.91 , c.92 , c.93 , c.94 , c.95 , c.96 , c.97 , c.98 , c.99 , c.100 , c.101 , c.102 , c.103 , c.258 , c.259 , c.260 , c.263 ]

Энциклопедия по машиностроению XXL

Оборудование, материаловедение, механика и ...