Анализ затухания флуоресценции методом

Анализ затухания флуоресценции методом наименьших квадратов [c.78]

В противоположность анализу импульсной кинетики затухания флуоресценции в литературе не появилось пока детального описания фазово-модуляционных методов анализа простых смесей флуорофоров. Далее, очевидно, что весовые факторы, используемые в уравнении (3.43), но подходят. Возможно, этот метод необходимо модифицировать, чтобы использовать ошибки в измерении величии < ф > и < т>. Как было показано ранее в этой главе, погрешности в<ф>и<т>не переносятся линейно на ошибки в [c.92]

Новое и в равной степени интересное приложение метода переноса энергии определение статических и динамических конформационных свойств макромолекул в растворе [ 4]. При детальном анализе кинетики затухания флуоресценции донора можио в принципе определить распределение расстояний между парами й - о и скорость, с которой донор и акцептор диффундируют относительно друг друга. С помощью таких измерений можно было бы выявлять детали структурной гетерогенности макромолекул и струк1 р1-1ые флуктуации этих молекул на сравнительно больших расстояниях ( 40 А). В настоящее время подобный детальный анализ требует тщательной оценки как при получении, так и при интерпретации спектральных данных, Тем не менее выявленные возможности метода переноса энергии скорее всего приведут к непрерывному развитию необходимых методов. [c.307]

Применение метода фазово-модуляционной флуорометрии также дает множество интересных возможностей для анализа реакций в возбужденных состояниях. Теория подробно описана в работе [ 13]. Здесь мы приведем ее в общих чертах, обратив внимгшие на вопросы, связанные со сдвигом фаз и степенью модуляции для процессов в возбужденных состояниях. Измере1гае времени затухания флуоресценции фазовым и модуляционным методами было описано в гл. 3. [c.405]

Поскольку применение метода ФЧРФ находится еще на самом начальном этапе, нам представляется очень важным суммировать все его потенциальные возможности и ограничения. Приведенные выше результаты были получены без усреднения сигнала, а интенсивность испускания без какой-либо необходимости была уменьшена в семь раз. Обычно отношение сигнал/шум в фазочувствительных спектрах превышает то, которое показано на рис. 4.3 и 4.8. Из анализа степени совпадения фазочувствительных спектров со спектрами стационарной флуоресценции отдельных компонентов ясно, что времена затухания необходимо определять с точностью 0,1нс [1]. Безусловно, для этого надо знать и стационарный спектр каждого компонента. Потенциальное разрешение по временам затухания вместе с разрешением по длинам волн, сравнимым с разрешением в стационарных спектрах, должно обеспечить регистрацию небольших изменений в значениях времен затухания или квантовых выходов флуоресценции компонентов. Такая чувствительность должна свидетельствовать о ценности данного метода для анализа любого образца с гетерогенным испусканием. [c.118]

В предыдущем разделе было отмечено, что для обратимой реакции в возбужденном состоянии измеренные величины предэкспоненциальных множителей и времен затухания являются сложными функциями всех кинетических констант системы (рис. 12 1). С помощью простого способа сложность такой зшзисимо-сти можно уменьшить [ 20]. Для применения методики необходимо, чтобы существовала спектральная область, где можио наблюдать испускание из состояния Р без перекрывания о испусканием из состояния / . Чтобы лучше разобраться в методике обратной свертки при различных длинах волн, следует учесть, что флуоресценция из состояния Е затухает по двухэкспоненциальпому закону, поскольку это состояние заселяется из состояния Р. Поняв это, можно применить простой метод анализа законов затуханиЯо Напомним, что время жизни непосредственно возбужденных частиц получается с помощью обратной свертки из закона затухания с временным профилем возбуждающего импульса (гл. 3), Аналогично время жизни состояния Е можно найти с помощью обратной свертки его закона затухания с возбуждающей функцией для этого состояния. Ею [c.398]

Энциклопедия по машиностроению XXL

Оборудование, материаловедение, механика и ...