Стерильная культура

МЕТОД СТЕРИЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ [c.328]

Возможен перевод в стерильную культуру в принципе всех частей растения, несмотря на большие различия между отдельными видами, органами и этапами развития органов (с. 331). [c.330]

Стерильная камера 328—329 Стерильная культура 332, 337 [c.530]

Несколько капель водной суспензии переносят на дно стерильной чашки Петри и затем заливают питательной агаровой средой. Или же в чашки Петри наливают стерильную агаровую питательную среду и оставляют для застывания затем добавляют несколько капель водной суспензии спор и, наклоняя чашку, разливают их по всей поверхности агаровой среды. Затем чашки с материалом помещают в термостат, нагретый до надлежащей температуры. За несколько дней споры прорастают, и образуются колонии. Отдельные колонии отбирают и петлей переносят на свежую стерильную питательную среду. Обычно таким образом получается чистая культура. Чтобы убедиться в этом, проросшую культуру снова пересевают разливом на пластинки. [c.32]

Примечание. Опыты проводили в пробирках объемом 50 мл с 1 мл минеральной среды и 15 мл топлива. Суспензию спор гриба готовили смывом стерильной водопроводной водой с налета культуры на скошенном сусловом агаре. От мицелия суспензию освобождали фильтрованием через стерильную вату. Количество спор в суспензии подсчитывали под микроскопом в камере Горяева. Определенные объемы суспензии вносили в минеральную среду. Пробирки закрывали резиновыми пробками, обернутыми фольгой. Гриб культивировали неподвижно при 28. .. 30 °С. Сухую биомассу определяли с помощью мембранных фильтров, используя на одно фильтрование весь объем культуры в пробирке. Знаком — отмечен рост очень слабый в виде тонкой прозрачной пленки. [c.513]

После стерилизации пробирки устанавливаются с наклоном в 10. .. 15° к горизонтальной плоскости, чтобы при застывании питательной среды образовалась косая поверхность. Застывание производится при температуре 20 5° С. После этого в специальном боксе, предназначенном для стерильных работ, производят посев чистых культур плесневых грибков на поверхность питательной среды. Посев производится специальной иглой из проволоки диаметром 0,5. . . 0,7 мм и длиной 90. . . 100 мм из нагревостойкого хромоникелевого или тому подобного сплава, впаянной в стеклянную рукоятку конец иглы, загнутый под пря-282 [c.282]

Приготовление водной суспензии производится следующим образом в пробирку со спорами культур грибков возрастом не старше 1 мес. наливается 5—6 см стерильной воды. Мосле многократного взбалтывания эта вода со взвешенными в ней спорами выливается в колбу, содержащую 50 стерильной воды. Приготовленная водная суспензия должна быть использована как можно скорее (не позднее чем через 24 ч). [c.424]

Потенциал железного электрода в период роста бактерий на 52 мв отрицательнее, чем потенциал электрода стерильной среды [13]. С помощью двух элементов с железными электродами было показано, что при заражении одного из них культурами бактерий, восстанавливающих сернокислые соли, общее внутреннее сопротивление понизилось с 15 до 1 ом, в то время как в стерильной ячейке наблюдалось повышение сопротивления. [c.497]

Рис. 4. Зависимость электросопротивления пленки на стальном электроде (площадь 2,55 см ) от времени в стерильном молочнокислом растворе и в растворе, содержащем культуру бактерий.

Железные проволочки помещали в пробирки со средой,, способной поддерживать жизнь бактерий, причем одну пробирку оставляли стерильной, а в другую прививали культуру через определенный промежуток времени вес проволоки в контрольной пробирке оказывался практически неизмененным, в то время как проволока из пробирки, где развивались бактерии, обнаруживала большую потерю веса [26]. [c.505]

Эффективность метода отдаленной гибридизации и быстрота достижения результата зависят от биологических особенностей культуры, в частности от способа ее размножения. Характерная Щ1Я многих гибридов Гх стерильность, огромный размах изменчивости в гибридных популяциях, трудности получения константных форм с наиболее благоприятным сочетанием хозяйственно важных признаков обусловливают неодинаковую вероятность успеха при работе с культурами, размножающимися семенами и вегетативным путем. [c.230]

Размножение в стерильных условиях в целях получения генетически идентичного материала отдельных ценных растений важно, с одной стороны, для предварительного размножения новых ценных сортов, селекционного материала, линий или для оздоровления материала от вирусов и, с другой стороны, оно служит предпосылкой для использования в будущем методов культуры пыльников или пыльцы при производстве гаплоидов, культуры каллуса, культуры суспензии клеток или осуществления их соматического слияния. [c.340]

Искусственным путем исходный материал создают посредством гибридизации (комбинационная, или синтетическая, селекция), воздействием химических и физических факторов (получение мутантов и полиплоидных форм), а также методом стерильной культуры клеток и тканей. [c.91]

ТОЛЬКО на основе клонирования в стерильных условиях. Получение линий путем инцухта у некоторых овощных культур вследствие сильной инцухт-депрессии часто вообще неосуществимо. Поэтому можно считать, что размножение различных овощных и декоративных культур методом стерильной культуры линий для производства гетерозисных семян экономически оправдано. [c.339]

Так, немецкая фирма АО Кляйнванцлебеиер Заатцухт, используя методы генной инженерии и стерильной культуры меристемы, успешно проводит селекцию сахарной свеклы по двум перспективным целевым проектам по изучению устойчивости к ризомании и перенесению контролирующего ее гена в клетки сахарной свеклы и по селекции с помощью генетических маркеров, При таком подходе свойства будущей линии, гибрида или сорта можно предвидеть уже в лаборатории, как например, устойчивость к той или иной болезни, которая контролируется определенными генами. [c.349]

После стерилизации пробирки, заполненные на 1/3 объема, ра.чмещают под углом (25 5)° к горизонтальной плоскости, чтобы при застывании пи-тэтель.чой среды образовалась скошенная поверхность. Застывание происходит при температуре (20 5) С. После этого в специальном боксе, предназначенном для стерильных работ, производят посев чистых культур плесневых грибков на поверхность питательной среды. [c.198]

Перед испытанием материалов или изделий на плеснестойкость споры плесневых грибков из каждой чистой культуры смывают дистиллированной водой водную суспензию спор всех восьми видов грибков возрастом 14—28 суток сливают в общую колбу, и она должна быть использована для заражения образцов материалов или изделий в течение 6 ч. Доступные поверхности образцов равномерно опрыскивают с помощью пульверизатора суспензией спор грибков и выдерживают в боксе при температуре (25 10) °С и относительной влажности воздуха 80% до высыхания капель, но не более 60 мин. Затем образцы материалов вместе с контрольными образцами питательных сред в стерильных чашках Петри располагают на расстоянии не менее 20 мм друг от друга и не менее 50 мм от стенок камеры (эксикатора). Развитие плесени в питательных средах служит показателем доброкачественности использованной суспензии спор. В камере поддерживают температуру (29 2) °С и относительную влажность воздуха более 90% (условия, наиболее благоприятные для роста плесени). Продолжительность испытаний с момента установления режима —28 суток Через каждые 7 суток крышку эксикатора приоткрывают на 3 мин для притока воздуха. [c.198]

Для изучения роли бактерий в процессе атмосферной коррозии металлов их выращивали методом Коха. С этой целью в чашки Петри наливали агар, который 15 мин выдерживали в условиях свободного доступа воздуха, затем их закрывали и помещали в термостат, где выдерживали при температуре 37 °С в течение 48 ч. После этого культуру микробов применяли для испытаний. Для этого в колбах Эрлемейра емкостью 670 мл на капроновых нитях подвешивали образцы различных металлов, обработанные по общепринятой методике. Культуру бактерий разводили в 2 мл дистиллированной воды, для каждого опыта помещали в колбы (в контрольные колбы наливали также по 2 мл дистиллированной воды, но не обогащенной бактериями). Опыты проводили в лабораторных условиях в течение 40 сут при температуре 18 2 °С, которая не вполне благоприятна для жизнедеятельности бактерий. Несмотря на это, на торцах стальных пластин, помещенных в бактериальной среде, примерно через 24 ч были обнаружены очаги коррозии. В контрольной же колбе признаки коррозии были обнаружены на 9 ч позже. По истечении 20 сут в целях изучения форм бактерий, поселившихся на образцах, последние сразу же после извлечения из колбы обмывали стерильной водой (по 5 мл на образец). После этого под микроскопом МБИ-6 были обнаружены в основном кокки и палочки. Затем продукты коррозии удаляли с помощью соответствующих реактивов для каждого вида металла и образцы выдерживали в эксикаторе в течение 24 ч, после чего их взвешивали. Результаты исследований приведены в табл. П. 4. [c.41]

Изучалась и биологическая коррозия ряда других металлов. В присутствии Aspergillus усиливалось растворение меди в почвенном экст-тракте [34]. В ряде чистых культур гетеротрофных морских бактерий (включая Ba illus tumes en) наблюдалась ускоренная коррозия хромомарганцевых сталей по сравнению с контрольными стерильными средами [36]. В то же время в работе [36] не удалось выявить различие скоростей коррозии углеродистой стали 1016 в неочищенной и стерилизованной аэрированной морской воде.-. [c.433]

Посев при помощи суспензии микроорганизмов или спор. К зрелым, прошедшим обильное спорообразование культурам, находящимся в пробирках, наливают на наклонную поверхность агаровой питательной среды мл стерильной воды. Бактериальной петлей проводят по поверхности колонии, чтобы споры попали в воду. Приготовленную таким образом суспензию вливают в пустую эрленмейеровскую колбу. Для посева из водной суспензии применяют стерильную пипетку, с помощью которой нужное количество суспензии переносят в жидкую питательную среду или на агаровый субстрат в чашках Петри. [c.29]

Метод Гансена. Образец культуры для посева вносят в стерильную воду. После этого несколько капель этой смеси переносят в маленькую колбочку с расплавленной агаровой питательной средой. Содержимое колбочки тщательно перемешивают, чтобы клетки правильно распределились, а затем одну каплю субстрата рассматривают под микроскопом. Если содержание клеток в ней достаточное (20—30), то каплю стерильного субстрата вносят во влажную камеру. Если клеток слишком много, необходимо добавить воды. Влажную камеру выдерживают при 20—25° С. Под микроскопом наблюдают разрастание клеток. Из числа выросших колоний осторожно бактериальной нетлей отбирают их из отмеченных мест и переносят на питательную среду. [c.32]

Метод с пленкой мицелия. Фунгицид растворялся в органическом растворителе (трихлорэтилене, циклогексаноне, растворителях Стоддарда или их комбинациях). Кожу пропитывали раствором и затем высушивали в течение 24 ч. Пленку мицелия готовили из суспензии спор на агар-агаре культуры Aspergillus niger в 100 мл дистиллированной воды, добавляя смачиватель. Суспензия спор тщательно распределялась по поверхности стерильной агаровой питательной среды в чашках Петри. Инкубация длилась около 48 ч при 29° С и относительной влажности 85—90%. [c.80]

Перед испытанием материалов или изделий на плесенестой-кость споры плесневых грибков из каждой чистой культуры смываются дистиллированной водой (на каждую пробирку с хорошо развившейся колонией грибков площадью 8. . . 10 см расходуется 50 мл воды) водная суспензия спор всех семи видов грибков сливается в общую колбу и должна быть использована для заражения образцов материалов или изделий в течение 4 ч. Образцы материалов вместе с контрольными образцами питательных сред в стерильных чашках Петри, развитие плесени на которых служит показателем доброкачественности использованной суспензии спор, располагаются на расстоянии не менее 20 мм друг от друга и от стенок камеры. В камере поддерживаются температура +30 2° С и относительная влажность воздуха 95. . . 100% (условия, наиболее благоприятные для роста плесени) материалы опрыскиваются из пульверизатора водной суспензией грибковой культуры (расход суспензии 1. .. 1,5 Jил на 100 поверхности испытуемых образцов). Образцы считаются выдержавшими испытание на плесенестойкость в том случае, если после выдержки их [c.283]

Перед посевом игла стерилизуется в пламени горелки. Во избежание попадания из воздуха примеси спор посторонних культур грибков ватные проСки пробирок открываются только иа время ввода стерильной иглы. Прежде чем открыть пробирку, нео(1ходимо верхние края ее и поверхность пробки обжечь в пламени горелки. То же самое необходимо проделать послс окончания посева. [c.424]

Часть осветленного мелассового сусла направляется в цех чистых культур. Для стерилизации и сохранения сусла в стерильном состоянии применяются аппараты Линдера, изготовленные из меди и луженые внутри. Маточные промежуточные аппараты выполняются из обыкновенного железа и покрываются кислотоупорным лаком. Внутри имеются медные змеевики для регулирования температуры и паропроводная трубка. [c.77]

Качество и культура производства. Каждого, кто приходит на наше предприятие, приятно поражают стерильно чистые производственные помещения, ухоженные газоны, множество цветов и декоративных деревьев и кустарников. Фанера производится из экологически чистых материалов, имеет класс токсичности Е1 и пригодна для использования в жилых помещениях, что подтверждается регулярно проводимым радиационным контролем и гигиеническим сертификатом, выданным Госсанзпидемнадзором России. [c.115]

Перспективный метод расхимеривания ткани — получение растений из отдельных клеток посредством разложения ткани с помощью ферментов и развития в стерильных условиях культур каллуса из изолированных отдельных клеток с последующим воспроизводством из каллуса целых растений. Другой способ — побудить развитие придаточных почек из листьев. Такие почки берут начало из определенной клетки и обеспечивают развитие нехимерных растений. [c.161]

Успешно проводил с 1884 г. межвидовые и межродовые скрещивания многих культур И.В. Мичурин. В 1888 г. немецкий селекционер В. Римпау впервые получил плодовитый гибрид между пшеницей и рожью. Мировую известность приобрели исследования Г.Д. Карпеченко по скрещиванию капусты и редьки, в которых он впервые указал путь преодоления бесплодия отдаленных гибридов и синтеза на их основе новых межвидовых форм. Развернутые в начале 30-х гг. работы академика Н.В. Цицина по скрещиванию пшеницы с пыреем и другими видами открыли широкие перспективы для практического использования метода отдаленной гибридизации в селекции. В дальнейшем такие работы были развернуты в ряде других стран (США, Канада, Австралия и др.). Исключительно большое значение для использования отдаленной гибридизации имела разработка метода культуры клеток и тканей в стерильных условиях. [c.214]

Селекция вегетативно размножающихся культур. Одно из главных препятствий для широкого использования полиплоидов, и прежде всего аутополиплоидов, в селекционной практике — их пониженная плодовитость по сравнению с исходными формами. Однако у тех растений, которые размножаются вегетативно, и у тех, где бессемянность желательна, стерильность оказывается даже выгодной. Поэтому в их селекции полиплоидия наиболее перспективна. [c.270]

У сахарной свеклы гетерозисная селекция возможна на основе комбинации генной и цитоплазматической мужской стерильности. У этой культуры андростерильную цитоплазму обозначают буквой кУ, а нормальную — N. Имеются два гена — восстановителя фертильности Х—х и Z—z. Их доминантные аллели подавляют влияние стерильной цитоплазмы. Кроме того, у сахарной свеклы наблюдается генная мужская стерильность, обусловленная рецессивным аллелем гена . Доминантный аллель обеспечивает мужскую фертильность (рис. 73). [c.323]

Клонирование на основе культуры меристем верхушек побегов в стерильных условиях. Пересаживаемые на искусственную питательную среду верхушки побега всегда включают кроме небольшой собственно меристемы стебля также и другие его элементы. Это относится и к получению безвирусного материала. Верхушки стеблей оказываются в условиях in vitro в большинстве случаев генетически стабильными. Непрерывный рост и регенерация корней достигаются без больших осложнений. На рисунке 78 схематически изображена последовательность работы при использовании этого метода. [c.338]

Клонирование в стерильных условиях как важная составная часть селекции на гетерозис. Селекция на гетерозис ведет не только к увеличению урожайности на 20—40% — гибриды в сравнении с обычными сортами более однородны. Поэтому получение гибридов F (называемых также гетерозисными гибридами) становится предпосылкой для интенсивной технологии возделывания некоторых овощных культур. Например, при выращивании цветной капусты эта технология предусматривает проведение однократной машинной уборки, что может быть гарантировано лишь при использовании гибрщ ов поскольку даже лучшие обычные сорта приходится убирать в 4—5 приемов. Производство элитных линий, их размножение, а также генетически идентичное вегетативное сохранение можно обеспечить [c.338]

Рис. 78. Культура верхушек побегов для размножения в стерильных условиях ценных элитных растений для последующего их использования (по Г. Лейке, Р. Лабес, К. Эртель, М. Петерсдорф, 1980)

Энциклопедия по машиностроению XXL

Оборудование, материаловедение, механика и ...