Фазочувствительный метод регистрации

Фазочувствительный метод регистрации флуоресценции [c.105]

Фазово-модуляционный метод измерения 61-66, 87, 90-103 изучение релаксации растворителя 235- 243, 256-257 Фазочувствительный метод регистрации флуоресценции 88, 105-121, 406, 428-435 [c.488]

СОСТОЯНИЯ Р усложняются. Это связано с тем, что в случае обратимой реакции затухание флуоресценции из состояния F становится двухэкспонеициаль-ным. Во-вторых, выражения для разности фаз между Я и F (Дер) и демодуляции Я относительно F т /гПр) довольно просты и содержат только кинетические константы состояния Я. Видно также сходство фазовых и модуляционных измерений при разных длинах волн с методикой обратной свертки при различных длинах волн. Когда измерения для Я проводят относительно , уменьшается сложность, неизбежная при непосредственном измерении параметров состояния Я. В разд. 12.6.2 будет показано, что при благоприятных условиях Дер можно измерять независимо от перекрывания спектров. Это достигается с помощью фазочувствительного метода регистрации флуоресценции. Следовательно, такое упрощение может быть полезным в эксперименте. [c.413]

Поскольку применение метода ФЧРФ находится еще на самом начальном этапе, нам представляется очень важным суммировать все его потенциальные возможности и ограничения. Приведенные выше результаты были получены без усреднения сигнала, а интенсивность испускания без какой-либо необходимости была уменьшена в семь раз. Обычно отношение сигнал/шум в фазочувствительных спектрах превышает то, которое показано на рис. 4.3 и 4.8. Из анализа степени совпадения фазочувствительных спектров со спектрами стационарной флуоресценции отдельных компонентов ясно, что времена затухания необходимо определять с точностью 0,1нс [1]. Безусловно, для этого надо знать и стационарный спектр каждого компонента. Потенциальное разрешение по временам затухания вместе с разрешением по длинам волн, сравнимым с разрешением в стационарных спектрах, должно обеспечить регистрацию небольших изменений в значениях времен затухания или квантовых выходов флуоресценции компонентов. Такая чувствительность должна свидетельствовать о ценности данного метода для анализа любого образца с гетерогенным испусканием. [c.118]

Следовательно, фазовый угол для состояния, появившегося в результате реакции, равен сумме фазовых углов для первоначально возбужденного состояния (фр) и состояния Я, если бы оно было возбуждено непосредственно (ф ) (все значения фазовых углов берутся относительно возбуждающего света). Это соотношение легко понять, зная, что заселение состояния Я идет из состояния Р. Точно такие же рассуждения мы проводили при описании метода обратной свертки иа различных длинах волн. Важное применение этого метода будет продемонстрировано в разд, 12.6.2, Мы увидим, что если известны индивидуальные спектры испускания, то с помощью методики фазочувствительной регистрации флуоресценции [ 30, 31 ] можно определить фазовые углы для каждого из видов частиц независимо от перекрывания спектров [32], Следовательно, можио измерить разность фаз между флуоресценцией из состояний F и Я и определить время жизни состояния Я. Другой способ - непосредственное определение на фазовом флуорометре сдвига фаз между длинноволновой и коротковолновой областями спектра испускания. При благоприятных условиях, когда при этих длинах волн отсутствует перекрывание спектров испускания состояний F и Я, разность фаз будет равна ф - ф , т.е, представляет собой разность фаз между испусканием из состояний Р и Я. Используя выражение для [c.406]

Энциклопедия по машиностроению XXL

Оборудование, материаловедение, механика и ...