Флуоресценция белков

Ответьте на следующие вопросы, касающиеся тушения флуоресценции белка [c.303]

Общая характеристика флуоресценции белков [c.351]

РИС. 11.25. Корреляции максимума испускания флуоресценции белков с бимолекулярной константой тушения кислородом [47]. [c.378]

РИС. 11.31. Зависимость времен затухания флуоресценции белков от длины волны [37]. [c.385]

БЕЛКИ. Триптофан - наиболее интенсивно флуоресцирующая аминокислота в белках. Около 90% всей флуоресценции белков обы шо обусловлено триптофаповыми остатками. Этот природный флуорофор крайне чувствителен к полярности окружающей среды. Спектральные сдвиги часто являются следствием нескольких явлений, среди которых можно выделить связывание лигандов, ассоциацию белок - белок и денатурацию. Кроме того, максимумы испускания белков отражают среднюю доступность их триптофановых остатков в водной фазе. Белки поглощают све-г вблизи 280 нм, а максимумы спектров флуоресценции лежат в области 320 -350 нм. Времена затухания флуоресценции триптофановых остатков лежат в диапазоне 1-6 нс. [c.24]

Можно обойти эту проблему, используя для измерения П-фактора различные длины волн возбуждения, поскольку С-фактор - это характеристика монохроматора испускания, а не длины волны возбуждения. Эта точка зрения может быть проиллюстрирована следующим примером. При изм1 [)1чши поляризации флуоресценции белка (340 нм) часто используют длину волны возбуждения 300 нм. Бри этой длине волны свет, выходящий из монохроматора возбуждения, почти полностью поляризован в вертикальном направлении, в результате чего интенсивность излучения в горизонтальном направлении недостаточна для измерения С-фактора. Поэтому для измерения нужно использовать несколько различных длин волн возбуждения, обычно 280, 285, 290 и 295 нм, и затем усреднить величину О-фактора. На практике эти величины почти одинаковы, но усреднение повышает точность определения. [c.40]

I,2 г/см . Времена затухания флуоресценции белков, меченных флуоресцеин ом, дансилом и пиренбутиратом равны 4, 10 и 100 нс соответственно. Примите для этих же зондов, что гд равно 0,38, 0,30 и 0,15 соответственно. [c.161]

Детальный анализ флуоресценции белков затрудняется как обилием факторов, которые влияют на флуоресценцию индольной составляющей, так и наличием в большинстве белков нескольких разных триптофановых остатков. Так как каждый остаток находится в разном окружении, то и спектральные свойства каждого остатка в общем случае различаются. Испускания всех остатков перекрываются во всем используемом диапазоне длин волн, и довольно слож- [c.345]

Что для интерпретации флуоресценции белков требуется рассмотрение и специфического, и общего влияния растворителя на триптофапсЬзые ост 1тки. [c.351]

Табпица 11.1. Максимумы испускания и времена затухания флуоресценции белков, содержащих единственный остаток триптофана [22] [c.359]

Типичный график Штерна - Фольмера для тушения флуоресценции белка кислорбдом приведен на рис. 11.24. Отметим, что константы тушения сравнимы с теми, которые наблюдаются для свободного триптофана. Для 12 изученных белков бимолекулярные константы тушения находятся в диапазоне (0,2 -0,5)-10 ° М - с". Если бы кислород не мог проникать внутрь белка, следовало бы ожидать, что график Штерна - Фольмера отклонится от прямой в сторону оси концентраций (разд. 9,8.4). Таких отклонений ие наблюдается, что указывает на приблизительно одинаковую доступность всех остатков в изученных белках. Более того, не существует корреляции между бимолекулярными кои [c.376]

Энциклопедия по машиностроению XXL

Оборудование, материаловедение, механика и ...