Деполяризация флуоресценции

Прежде чем продолжить дальнейшее обсуждение факторов, приводящих к деполяризации флуоресценции, полезно разобраться в методах, которые используют для измерения анизотропии или поляризации. Мы коснемся здесь стационарных измерений, но подобное изложение применимо и к кинетическим измерениям анизотропии. Обычно используют два метода однолучевой (L-формат), в котором используется один канал регистрации испускания, и двухлучевой (Т-формат), в котором параллельная и перпендикулярная составляющие наблюдаются одновременно в разных каналах. Каждый метод имеет свои преимущества. Методика, описанная ниже,. введена для корректировки различной чувствительности прибора при регистрации по-разному поляризованных составляющих испускания (гл. 2). [c.136]

Внешние причины деполяризации флуоресценции [c.142]

РИС. 6.2. Зависимость деполяризации флуоресценции от времени. [c.167]

Когда нет возможности свести влияние флуоресценции к пренебрежимо малым величинам, следует измерять ее относительную (по отношению к рассеянному свету) интенсивность и деполяризацию и вносить поправки, руководствуясь приведенной выше формулой (10.12). [c.160]

Влияния вращательной диффузии и переноса энергии легко разделяются рациональным выбором экспериментальных условий. Например, броуновское вращение вызывает пренебрежимо малую деполяризацию, когда скорость вращения значительно меньше скорости испускания флуоресценции. Это иллюстрируется уравнением Перрена [c.142]

Написанная весьма доступно, но без ущерба для строгости изложения, книга может служить пособием начинающим работать в этой области для изучения основ и приложений флуоресцентной спектроскопии. В то же время она может быть весьма полезной и специалистам, которые найдут в ней подробное рассмотрение методических вопросов и современные данные о процессах релаксации среды, тушения флуоресценции, переноса энергии, деполяризации флуоресценции, адиабатических реакциях в возбужденном состоянии, ц)луореспент11Ых свойствах белков. Книга сйабжена большим количеством четких, наглядных рисунков, диаграмм, спектров, таблиц, многие из которых взяты из оригинальных работ. К большинству глав даны задачи и упражнения, а в конце книги разобраны их решения. [c.5]

Безызлучательный перенос энергии происходит только в концентрированных растворах, где среднее расстояние между молекулами флуорофора сравн 1мо с характеристическим радиусом который обычно составляет 50 А. Можно легко вычислить, что для получения такого среднего расстояния необходима концентрация порядка 0,013 М. Эта концентрация значительно больше, чем обычно необходимо для флуоресцентных измерений (10 М). Таким образом, безызлучательный перенос энергии легко исключается при использовании разбавленных растворов. Внешние причины деполяризации флуоресценции объединены в табл. 5.2, составленной по данным Вебера [ 3]. [c.143]

Деполяризация флуоресценции 142-145, 151, 179-180, 185 Дибензо[а,л]антрацен 117 Дибензо[с, ]карбазол 117 Димеры 18, 161,322-324. См. также Эксимеры [c.484]

Удобный для работы фотоэлектрический поляриметр предложен Тумерманом [176] и использован им для измерения степени поляризации излучения флуоресценции. Фотометр, основанный на том же принципе, с успехом может быть использован и для измерения коэффициента деполяризации рассеянного света. [c.154]

Флуоресценция так же искажает величину коэ зфициента деполяризации, как и комбинационное рассеяние света. Выявить 41аличие света флуоресценции в изучаемой среде можно обычным методом скрещенных светофильтров. [c.159]

Анизотропия флуоресценции, измеряемая в разбавленных стеклообрам-ных pa TEopax, определяется собственными спектральными свойствами флуорофоров. Это происходит потому, что высокая вязкость раствора препятствует заметной вращательной диффузии до испускания. Более того, в очень разбавленных растворах ни перенос энергии, ни реабсорбция не могут вызвать деполяризацию испускания. Этот особый случай будет описан детально потому, что его обсуждение без чрезмерного усложнения выявляет фундаментальные свойства анизотропии. [c.126]

Подстановка (5.18) в (5.19) дает соа20 = 3/5. С учетом уравнения (5.17) можно найти максимальную, анизотропию, равную 0,4. Это значение получается, когда диполи поглощения и испускания параллельны и нет других процессов, приводящих к деполяризации. Легко заметить, что это значение (0,4) гораздо меньше, чем возможное для рассеянного света (1,0). Фактически, если измеренная анизотропия для случайно ориентированного образца больше чем 0,4, можно уверенно сделать вывод о присутствии рассеянного света в дополнение к флуоресценции. Максимальное значение анизотропии 0,4 для параллельных диполей поглощения и испускания является следствием того, что вероятность поглощения света равна сов 0. [c.130]

Может показаться странным, что столько внимания уделяется деполяризации, в то время как в гл. 1 и разд. 5.4.2 утверждалось, что рассеянный свет может приводить к ошибочно высоким значениям измеряемой анизотропии. Оба утверждения верны, что связано с сильной поляризацией рассеянного света. Предположим, что оптические условия не устраняют весь рассеянный свет. Если некоторая часть рассеяшюго света измеряется как флуоресценция, можно легко показать из уравнения (5.6), что измеряемая анизотропия будет слишком большой. Альтернативно предположим, что созданы такие оптические условия, которые предотвращают попадание в детектор какого-бы то ни было рассеянного света. Если раствор мутный, флуорофоры могут возбуждаться рассеянными фотонами или испускание может быть рассеяно до того, как оно достигнет детектора. В любом из этих случаев испускание будет деполяризовано. Регистрация рассеянного света как флуоресценции увеличивает значение измеряемой анизотропии, но рассеяние как падающего света, так и флуоресцентного испускания уменьшает измеряемое значение анизотропии. [c.144]

Энциклопедия по машиностроению XXL

Оборудование, материаловедение, механика и ...