ПОИСК Статьи Чертежи Таблицы Методы микроскопии и типы микроскопов из "Руководство по дисперсионному анализу методом микроскопии " Изучение препарата при рассмотренном способе освещения называется методом светлого поля в проходящем свете. При реализации данного метода необходимо обеспечить достаточно строгую соосность оптических осей объектива и осветительной системы. Этот метод применяют для исследования прозрачных препаратов с элементами, по разному поглощающими свет. [c.36] Если сместить ось конденсора относительно оси объектива, то ось светового пучка, падающего на препарат, отклонится от перпендикулярного направления на некоторый угол. Когда этот угол составит около 30°, возникает эффект так называемого косого освещения. При этом контуры объектов наблюдения окажутся подчеркнутыми за счет образования теней, и частицы будут выглядеть более рельефно. Изучение препарата при смещенных относительно друг друга осях конденсора и объектива называется методом одностороннего косого освещения. Этот метод применяется для исследования препаратов с низкой абсорбционной способностью. [c.36] При дальнейшем смещении апертурной диафрагмы конденсора относительно оси объектива до тех пор, пока световой пучок, направляемый конденсором на препарат, совсем не попадает в объектив, метод косого освещения превращается в метод темного поля в проходящем свете (рис. 2.26). В поле зрения микроскопа на темном фоне получаются светлые изображения частиц препарата за счет рассеянного им света. Метод применим для получения изображений прозрачных, непоглощающих, а поэтому и невидимых при наблюдении в светлом поле объектов. [c.36] При исследовании частиц в отраженном свете препарат освещают сверху, через объектив микроскопа, который выполняет при этом одновременно и роль конденсора. В этом случае также возможно наблюдение препарата в светлом и темном полях. [c.36] Построение изображения и ход лучей в оптической системе микроскопа при освещении объекта отраженным светом а — по методу светлого поля I — объект 2 — конденсор 3 — выходной зрачок объектива 4 — пластинка Бека 5 — изображение объекта б — по методу темного поля 1 — объект 2 — объектив 3 — зеркало с асферической повер-х-ностью 4 — плоское кольцевое зеркало 5 — изображение объекта 6 — диафрагма. [c.37] Методы светлого и темного поля в отраженном свете чаще всего применяют для исследования непрозрачных частиц сложного строения. При этом ход лучей в самом микроскопе остается таким же, как при работе с проходящим светом. [c.37] Другие микроскопические методы исследования — флуоресцентная и ультрафиолетовая микроскопия — принципом построения изображения не отличаются от обычной. Различие состоит лишь в том, что в осветительную и наблюдательную системы микроскопа вводятся светофильтры, выделяющие из светового пучка строго определенную часть спектра источника света (например, коротковолновое, фиолетовое излучение в случае флуоресцентной микроскопии). [c.39] Флуоресцентная микроскопия дает возможность изучать частицы, состоящие из различных веществ. В результате освещения препарата снизу или сверху синефиолетовыми или ультрафиолетовыми лучами возбуждается флуоресценция препарата или специального красителя (который вводится в препарат). При этом вещество испускает видимый свет с характерным для него спектральным составом. [c.39] Ультрафиолетовая микроскопия основана на использовании свойств избирательного поглощения многих прозрачных и бесцветных объектов в коротковолновой области спектра. Поэтому исследование частиц в ультрафиолетовых лучах позволяет увидеть их структуру, а малая длина, волны этих лучей увеличивает разрешающую способность микроскопа приблизительно вдвое, по сравнению с освещением светом видимой области спектра. Невидимое ультрафиолетовое изображение можно преобразовать в видимое с помощью электроннооптического преобразователя или фотографирования. Использование фотослоев, чувствительных к невидимой ультрафиолетовой части спектра, обеспечивает более высокое качество изображения на микрофотографии, чем на экране электронно-оптического преобразователя или флуоресцирующем экране соответствующих микроскопов. [c.39] В исследовательских лабораториях, занимающихся изучением частиц, желательно иметь приборы, обеспечивающие использование большинства методов. Это исследовательские универсальные микроскопы типа МБИ фирмы ЛОМО (Ленинградское оптико-механическое объединение). Для лабораторий промышленных предприятий или исследовательских лабораторий, связанных с изучением однообразных частиц в проходящем свете, можно рекомендовать приборы из группы биологических микроскопов серии БИОЛАМ-70 или аналогичных им микроскопов типа МБР, выпускавшихся до 1970 г. [c.40] В табл. 2.1 даны характеристики микроскопов отечественного производства, рекомендуемых для дисперсионного анализа частиц аэрозолей и порошков. [c.40] Наибольшее распространение для исследования дисперсного состава частиц получил биологический микроскоп МБИ-3. Этот прибор обладает высокой разрешающей способностью, позволяет исследовать препараты любых видов (путем применения специальных приспособлений и устройств), прост по конструкции. [c.40] Оптическая схема микроскопа МБИ-3 (рис. 2.5) включает в себя осветительную систему, состоящую из зеркала 1 и конденсора 4 с ирисовой апертурной диафрагмой 3, и наблюдательную, в которую входят объ ектив 6, дополнительная линза 7 и призмы 8, 9 бинокулярной насадки с окулярами 10. Эта схема подобна рассмотренной выше (см. рис. 2.1). [c.40] Конденсор любого типа предназначен для того, чтобы создать наиболее благоприятные условия для освещения объекта и полного использования апертуры объектива. [c.44] Объективы и окуляры являются основными оптическими узлами микроскопа, они обеспечивают получение изображения исследуемого объекта. Для улучшения условий работы наблюдателя при визуальных наблюдениях можно использовать бинокулярную насадку, также входящую в комплект микроскопа. [c.45] Объектив дает увеличенное действительное изображение исследуемого объекта. Он представляет собой систему линз, заключенных в металлическую оправу. [c.45] В СССР выпускаются объективы для биологических микроскопов, рассчитанные, на длину тубуса 160 мм и толщину покровного стекла 0,17 мм, а также для специальных микроскопов, применяемых без покровных стекол, с длиной тубуса 190 мм и бесконечной длиной тубуса. Объектив с тубусом бесконечность проецирует изображение на бесконечное расстояние. Такой тубус применяют совместно с дополнительной ахроматической (тубусной) линзой, которая переносит изображение из бесконечности в фокальную плоскость окуляра. [c.45] Апохроматические объективы представляют собой оптические системы, обеспечивающие лучшее исправление сферической аберрации, астигматизма и комы, по сравнению с ахроматами. Кроме того апохроматы отличаются от ахроматов улучшенной хроматической коррекцией, устраняющей вторичный спектр. Однако апохроматы дают более заметную кривизну поля изображения, что приводит к нерезкости последнего по краям. Кривизна поля частично или полностью устраняется применением компенсационных окуляров. При работе с этими объективами большое значение приобретает центрировка всей оптической системы микроскопа. Изображение поля с помощью апохроматов получается выпуклым, лишенным плоскостности. По конструкции они более сложные, чем ахроматы, и имеют меньший интервал фокусных расстояний (рис. 2.9). [c.47] По степени исправления аберраций к апохроматам близки зеркально-линзовые объективы (рис. 2.10). Отличительной особенностью их является введение в. оптическую систему выпуклых, вогнутых и плоских зеркал, которые не дают явлений хроматизма. Зеркально-линзовые объективы экранируют центральную часть пучка лучей, что приводит к увеличению разрешающей способности микроскопа, но в то же время понижает контрастность изображения. Чаще всего такие объективы применятся для исследований в ультрафиолетовой области спектра, для которой трудно создавать линзовые объективы из-за недостатка оптических материалов. Их преимуществом перед линзовьШи объективами является также увеличенное, по сравнению с последними, рабочее расстояние (при равных, апертурах и увеличениях). [c.47] Вернуться к основной статье